Biblioteki

 0    13 flashcards    magdapawlowska45
download mp3 print play test yourself
 
Question Answer
biblioteka genomowa
start learning
zbiór fragm chromosomalnego i oranelarnego DNA org umieszczonych w okr wektorach (wielkość zal od met i przygorowania DNA)
bibloteka cDNA
start learning
analogiczny zbiór fragm DNA powstałych na matrycy mRNA poprzez odwrotną trankrypcję (wielkość fragm zal od długości mRNA i metody)
Biblioteka cDNA liczebność
start learning
liczebność zależy od poziomu transkrypcji poszukiwanego genu – udział w puli cDNA
Biblioteka znormalizowana
start learning
zawiera wyrównanie liczebności cDNA poszczególnych genów
Reakcja chemiczna II-rzędu
start learning
r=k[A][A]=k[A]2 r- szybkość rcji [A]- stężenie substratów tu nić DNA
Normalizacja bibliotek cDNA
start learning
mniej więcej równa reprezenacja licznych i mniej licznych transkryptów
Wytrącanie cząsteczek kw nulk z roztworów
start learning
Biotynę można dodać do czapeczki lub startera, streptamidyną pokryte są kulki metalowe i można te cząsteczki wytrącić z roztworu bo one razem się prawie magnetycznie łączą
Wytrącanie cząsteczek kw nulk z roztworów i zależność szybkości od stężenia
start learning
Jeżeli mamy duże stężenie obydwu nici to reakcja renaturacji przebiega szybciej. Jak małe to o wiele wolniej
przeglądanie różnicowe (differential screening)
start learning
w stos dużym zbiorze klonów (bibl) wyszukiwanie pojedynczych klonów, które ulegaja ekspresji tylko w jednej ze sprawdzanych tk (organi, stanie fizjol)
Subtrakcja (subbtraction)
start learning
(tworzenie bib subtrachowanej) masowe i automatyczne
Standardowe przeglądanie biblioteki
start learning
• zwykła bibl cDNA (z mRNA +): poszukiwanie gł klonów indukowanych • wysiew bibl i odciski replik na filtrach • konstrukcja sond molek + i – cDNA i hybrydyzacja
Cold plaque screening -, przeglądanie zimnych łysinek” (virtual subtraction)
start learning
• bibl cDNAA z mRNA + nie trzeba replik odcisków • sonda z mRNA - • ciekawe są te łysinki które nie hybrydyzują
dotblot z cDNA z tkanki (zal od stężenia)
start learning
jak go jest dużo to pojawia się w postaci ciemnej plamki. Izoluje się taką sekwencję i mnoży PCR. Umożliwia też sklonowaie genów o niskim poziomie ekspresjii

You must sign in to write a comment